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探討紅外分光光度計的常用波長(cháng)
更新時(shí)間:2019-03-13 點(diǎn)擊次數:1781
   探討紅外分光光度計的常用波長(cháng)
  紅外分光光度計廠(chǎng)家的分光光度計是利用分光光度法,通過(guò)測定被測物質(zhì)在特定波長(cháng)處或一定波長(cháng)范圍內光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類(lèi)的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(cháng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源。光源透過(guò)測試的樣品后,部分光源被吸收,通過(guò)測量樣品的吸光值,經(jīng)過(guò)計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
  紅外分光光度計常見(jiàn)用途和波長(cháng)有哪些?
  1.核酸定量
  核酸的高吸收峰的吸收波長(cháng)260 nm。利用260nm的波長(cháng)可以定量測量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA的濃度。
  除了核酸濃度,分光光度計同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類(lèi)物質(zhì)的影響。
  A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
  A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。
  2.蛋白質(zhì)直接定量
  這種方法是在280nm波長(cháng),直接測試蛋白。選擇Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。
  3.細菌細胞密度
  細菌培養過(guò)程中,需要采用分光光度計準確測定細菌細胞密度。
  追蹤液體培養物中微生物生長(cháng)的標準方法在600nm波長(cháng)下,以未加菌液的培養液作為空白液,測量定量培養后的含菌培養液。

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